У грі Spider-Man 3, заснованій на однойменному фільмі 2007 року, гравцям належить керувати титулованим героєм, який намагається знову врятувати Нью-Йорк від об'єднаної загрози Нового Гобліна, Пісочної людини і Венома.
Ця версія гри являє собою двомірний платформер з бічною прокруткою і стилізованими під 3D елементами. Керування грою здійснюється в основному за допомогою сенсорного екрана. Гравці використовують стилус для ведення бою, створення павутини і взаємодії з предметами. Гра також дає змогу гравцям узяти участь у сюжетних лініях, які не були досліджені в третьому фільмі, наприклад, зустрітися зі знайомими лиходіями Людини-павука з міфології коміксів.
Одним із головних акцентів нової гри є ввімкнення чорного костюма симбіота Людини-павука. Коли лічильник "люті" Людини-павука накопичується, чорний костюм автоматично перебирає на себе управління, даючи змогу Людині-павуку стати швидшим, агресивнішим і потужнішим.